慢病毒包裝
慢病毒載體可以將外源DNA有效地整合到宿主染色體上,從而達到持久性表達目的序列的效果。對于一些較難轉染的細 胞,如原代細胞、干細胞、不分化的細胞等,使用慢病毒載體,能大大提高外源DNA的轉導效率。根據構建好的基因過表達、RNA干擾、miRNA表達/抑制慢病毒載體,將重組病毒質粒及其輔助包裝質粒共轉染至包裝細胞中,收集富含慢病毒顆粒的細胞上清液,對其濃縮后得到高滴度的慢病毒濃縮液,在293T細胞中測定病毒滴度。 技術路線 : 技術特點: 慢病毒載體包裝之后成為假病毒顆粒后,可用于 1. 感染原代細胞 2. 制備穩定表達/沉默特定基因的單克隆細胞株 3. in vivo的基因操作 4. 轉基因動物,特別是轉基因大鼠的制備 我們提供: 1. 提供1-5ml 滴度>108或109TU/ml慢病毒,并提供對應的空病毒對照 2. 提供滴度測定報告一份 3. 慢病毒包裝所需試劑耗材、儀器設備、操作過程一份 結果示意圖: 服務周期:服務內容說明價格實驗周期載體構建(提供10ug)基因過表達載體基因<1.0Kb詢價2周1.0Kb <基因<2.0Kb詢價2-3周2.0Kb<基因<3.0K詢價2-3周基因>3.0Kb詢價2-3周RNA干擾載體shRNA載體3份并篩選出*佳詢價3周miRNA過表達載體詢價2周miRNA抑制載體詢價2周熒光素酶靶基因報告載體詢價2周慢病毒包裝一般純化滴度>1X108 TU/ml 提供量1ml詢價2周滴度>1X108 TU/ml 提供量5ml詢價2周 溫馨提示: 1. 慢病毒在-80℃保存6個月,滴度不會明顯下降。建議保存6~12個月以上的樣品,進行實驗前,重新測一次滴度 2. 慢病毒應盡量避免反復凍融(小于3次) 3. 所有操作均應盡量在BSL2級生物安全柜中進行,并佩戴一次性口罩和手套,尤其要避免病毒接觸口、 眼、鼻、耳、傷口等身體開放性區域 4. 使用前從-80℃取出病毒,立即放在37℃水浴鍋中,輕輕晃動,使其盡快溶解,操作過程應置于冰盒上進行 5. 用不完的病毒可以暫時放在4℃冰箱中,但**盡快用完